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Pierce 胰蛋白酶酶切试剂盒 protein in-gel tryptic digestion kit 89871

Pierce 胰蛋白酶酶切试剂盒 protein in-gel tryptic digestion kit 89871

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Pierce 胰蛋白酶酶切试剂盒 protein in-gel tryptic digestion kit 89871

Pierce 胶内胰蛋白酶酶切试剂盒
Pierce 胶内胰蛋白酶酶切试剂盒提供了一整套试剂,用于在胶体考马斯或荧光染料染色蛋白条带上进行约 150 次酶切。该试剂盒包括经修饰的猪胰蛋白酶、脱色缓冲液、还原试剂、烷基化试剂和酶切缓冲液以及详细而简单的说明。
包括蛋白凝胶脱色、还原、烷基化和胰蛋白酶酶切的所有必要试剂
经过优化的程序和试剂可使用多种条件生成可靠的酶切物和数据
包含高纯度和经修饰的 MS 级胰蛋白酶,该胰蛋白酶不具有糜蛋白酶活性,具有极低程度的自溶活性
两个样品制备步骤是将蛋白完全酶切成肽段,然后浓缩和纯化肽段进行质谱分析。Pierce 胶内胰蛋白酶酶切试剂盒可完成这些步骤中的第一步,从凝胶切片中提取蛋白质样品。Pierce C-18 离心柱和吸头可完成第二步,纯化 MS 即用型样品。

样品制备是蛋白质 MS 分析中较复杂、较耗时的步骤之一,且样品提取和制备的质量和重现性对结果有显著影响。有时,需要采取额外步骤来提高样品质量,包含从 SDS-PAGE 凝胶中酶切和回收肽片段,或进行肽胍基化以改善序列覆盖范围。每种试剂盒均经过优化,以产生高质量的肽酶切物,从而通过质谱进行可靠的蛋白质组学分析。

胰蛋白酶可特异性切割精氨酸和赖氨酸残基的羧基侧肽键。由于较高碱性的侧链,含精氨酸的肽的信号通常更强。为了增强整体电离,胍基化将赖氨酸转化为高精氨酸,并且对赖氨酸的胺具有特异性,但肽 N 末端的胺反应可能极轻微。这种衍生化会提高含赖氨酸的肽的强度并改善整体序列覆盖率。

Pierce 溶液内胰蛋白酶酶切和胍基化试剂盒
Pierce 溶液法胰蛋白酶酶切和胍基化试剂盒提供了优化的程序及可供约 90 份酶切物(每份含 0.025 至 10 µg 蛋白)使用的试剂。
胰蛋白酶可酶切 0.025-10 µg 范围内的蛋白(∼90 次反应)
胍基化反应几乎不会产生 N 端修饰
括用于酶切、还原、烷基化和胍基化的试剂
一天内即可完成蛋白的酶切和胍基化