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英国 TwistDX 等温扩增试剂盒 TABAS03KIT

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英国 TwistDX 等温扩增试剂盒 TABAS03KIT

TwistAmp DNA扩增试剂盒提供所需试剂用于将核酸模板材料从痕量水平 扩增到可检测水平(从单个模板分子扩增到约1012个分子的扩增产物)。该技术的生物化学基础是聚合酶与 DNA 重组/修复蛋白(包括重组酶)的组合。两者组合得到的酶混合物在低温下(最佳约 37-42°C)具有活性,能够通过寡核苷酸引物特异性地识别模板靶位点的序列,随后发生 DNA的链置换合成,从而使模板中的靶区域呈指数扩增。在多数情况下,使用 TwistAmp 试剂盒进行扩增时扩增速度非常快(最佳条件下),产物可在10分钟内达到可检测水平。

TwistAmp等温扩增技术的基础是TwistDx开发的重组酶聚合酶扩增(RPA)过程(请。对 RPA扩增产物可在终点进行检测,也可进行实时检测,检测方法多样,其中包括凝胶电泳法、基于探针的荧光检测法或者简便的免仪器“夹心分析”法,例如横向流动试纸条。RPA程采用了称为重组酶的酶,其原型是大肠杆菌 recA,该重组酶可结合单链核酸骨架(在本扩增技术中为标准寡核苷酸),并刺激形成的蛋白质-DNA 复合物寻找双链 DNA中的同源序列。找到同源序列后进行链置换反应,寡核苷酸与其互补链配对,以便聚合酶从 3’末端启动合成过程。TwistAmp扩增过程使用两个方向相反的寡核苷酸引物来启动每起合成事件。以类似PCR的方式为靶标设计的这些引物可实现指数级的扩增过程。